1. 菌種老化

   菌種如果經(jīng)過(guò)連續(xù)頻繁的傳代達(dá)十幾次甚至幾十次，就會(huì)造成菌種老化，岀現(xiàn)生長(zhǎng)緩慢甚至不生長(zhǎng)的情況。

2. 野生菌種

   相比于標(biāo)準(zhǔn)菌株，有一些野生分離的菌種本身比較脆弱，對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求比較高，對(duì)外界不良環(huán)境也比較敏感，難以在普通的平板上生長(zhǎng)，往往需要加入特殊的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

3. 菌種沒(méi)有進(jìn)行充分活化

   當(dāng)我們拿到一株菌的時(shí)候，該菌種往往是處于—個(gè)保藏狀態(tài)的，這就需要我們通過(guò)合適的培養(yǎng)基來(lái)逐代擴(kuò)大培養(yǎng)，得到活力旺盛的菌株，所以充分活化的目的就是要讓菌種逐漸適應(yīng)培養(yǎng)環(huán)境，從而在平板上快速生長(zhǎng)。

4. 樣品中的菌

   有的樣品中本身含菌量就較少，如水樣、供試液等，接種量低造成平板上無(wú)菌生長(zhǎng)。還有的樣品中含有一些抑菌成分，會(huì)殺死樣品中的菌，導(dǎo)致無(wú)菌落生長(zhǎng)。

5. 購(gòu)買的商品化菌株

   有一些商品化的菌株，如益生菌、菌肥、可食用真菌等，本身進(jìn)行過(guò)基因改造，不能進(jìn)行連續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)，故在平板上難以生長(zhǎng)。

1、容器未洗刷干凈，殘留的抑菌成分導(dǎo)致菌不生長(zhǎng)。

2、培養(yǎng)基配置過(guò)程中稱量錯(cuò)誤，加入添加劑比例錯(cuò)誤等。

3、過(guò)度滅菌，有很多培養(yǎng)基成分不耐高溫，過(guò)度滅菌會(huì)導(dǎo)致成分失效。

4、調(diào)pH值錯(cuò)誤，不同溫度下培養(yǎng)基的pH值也會(huì)不一樣，未正確的調(diào)配pH值，也會(huì)導(dǎo)致菌不生長(zhǎng)。

5、在實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中失誤，特別是在稀釋菌液過(guò)程中少接或者錯(cuò)接菌。

6、未放置合適的培養(yǎng)條件，根據(jù)不同菌對(duì)氧氣的需求程度，可以分為需氧、厭氧、微需氧培養(yǎng)等。根據(jù)不同菌對(duì)溫度的需求，又可以在25°C、30°C、35°C、42°C、56°C等不同溫度下培養(yǎng)。

1、成品培養(yǎng)基本身質(zhì)量不好，如原材料純度不高、含有抑菌成分、原材料之間配比錯(cuò)誤等都會(huì)導(dǎo)致成品培養(yǎng)基不合格。

2、特殊培養(yǎng)基及添加劑未正確存放，未遮光、冷藏、嚴(yán)格密封保存等導(dǎo)致失效。

3、培養(yǎng)基及添加劑超過(guò)有效期或者臨近有限期，營(yíng)養(yǎng)成分存在一定程度的失效導(dǎo)致菌不生長(zhǎng)。

4、培養(yǎng)基及添加劑營(yíng)養(yǎng)不夠或者不適合培養(yǎng)某類菌種。有一些菌種本身營(yíng)養(yǎng)要求比較特殊，需要添加某些特殊營(yíng)養(yǎng)后方能生長(zhǎng)。

5、培養(yǎng)基pH值發(fā)生改變，有一些特殊的成品培養(yǎng)基pH值隨時(shí)間會(huì)存在一定程度的改變，在使用前需要對(duì)pH值重新進(jìn)行調(diào)整，否則也會(huì)導(dǎo)致菌不生長(zhǎng)。