動物實驗中常用的麻醉劑分為三類，即揮發性麻醉劑、非揮發性麻醉劑和中藥麻醉劑。
1．揮發性麻醉劑 這類麻藥包括乙醚、氯仿等。乙醚吸入麻醉適用于各種動物，其麻醉量和致死量差距大，所發安全度亦大，動物麻醉深度容易掌握，而且麻后蘇醒較快。其缺點是對局部刺激作用大，可引起上呼吸道粘膜液體分泌增多，再通過神經反射可影響呼吸、血壓和心跳活動，并且容易引起窒息，故在乙醚吸入麻醚時必需有人照看，以防麻醉過深而出現上情況。
2．非揮發性麻醉劑 這類麻醉劑種類較多，包括苯巴比妥鈉、戊巴比妥鈉、硫噴妥鈉等巴比妥類的衍生物，氨基甲酸乙脂和水合氯醛。這些麻醉劑使用方便，一次給藥可維持較長的麻醉時間，麻醉過程較平衡，動物無明顯掙扎現象。但缺點是蘇醒較慢。
3．中藥麻醉劑 動物實驗時有時也用到象洋金花和氫溴酸東莨菪堿等中藥麻醉劑，但由于其作用不夠穩定，而且常需加佐劑麻醉效果才能理想，故在使用過程中不能得到普及，因而，多數實驗室不選用這類麻醉劑進行麻醉。