細胞表面抗原染色的組織樣本制備方法

1.將組織(10-20mm)切成1-2mm的碎片，用緩沖液或培養液浸濕。
2.用1ml緩沖液或培養液預洗Medicon 二遍。
3.將組織和1ml緩沖液或培養液放入到Medicon中，蓋上蓋子，將Medicon 插入到Medimachine中。
4.降解組織。降解組織的時間長短依賴于組織類型。(參見降解時間表)。
5.用注射器通過 Medicon上的注射器接口將上清吸去。
6.用1ml緩沖液或培養液沖洗Medicon三遍。
7.選擇適當大小孔徑的Filcon 濾器過濾細胞懸液。(50-mmFilcon 適用 于大 多數組織，如：淋巴結、腫瘤組織、皮膚組織)
8.用1ml緩沖液或培養液沖洗Filcon三遍。
9.250g離心細胞懸液5分鐘。
10.用適當的緩沖液或培養液重懸細胞沉淀。
11.若需要，重復3－10步驟。
12.調節細胞濃度至5×105－1×106/ml。
13.用適當濃度的抗體在2－80C與100ml細胞懸液孵育15-30分鐘。
14.加2ml 冷的緩沖液或培養液(2－80C), 250g離心5分鐘。
15.用緩沖液或培養液重懸細胞沉淀。
16.分析樣本。